Q：電泳條帶模糊?
A：
? 電泳緩沖液緩沖能力差。 電泳緩沖液多次使用后，離子強度降低，pH值上升，緩沖性能下降，可使DNA電泳產(chǎn)生條帶模糊和不規則的DNA條帶遷移的現象。
? 電壓過(guò)高，電泳時(shí)間過(guò)長(cháng)。電泳時(shí)電壓不應該超過(guò)20 V/cm，電泳溫度應該低于30℃。如果電泳時(shí)電壓和溫度過(guò)高，可能導致出現條帶模糊和不規則的DNA條帶遷移的現象。特別是電壓太高易出現缺帶現象。電泳過(guò)程中由于會(huì )產(chǎn)熱，因此電泳時(shí)間長(cháng)容易發(fā)生條帶模糊，特別是小片段會(huì )變得模糊。
? 凝膠放置時(shí)間太長(cháng)或瓊脂糖的質(zhì)量差，導致DNA 條帶分辨率降低。
Q：DNA Marker 降解?
A：污染了核酸外切酶。建議用滅菌的槍頭，用后及時(shí)將管蓋擰緊。點(diǎn)樣時(shí)勿將電泳緩沖液帶入管中，建議更換槍頭。
Q：用EB瓊脂糖膠電泳不同時(shí)間會(huì )出現條帶亮度變化?
A：由于電泳過(guò)程中條帶與EB泳動(dòng)方向相反，結合EB的量會(huì )隨時(shí)間變化，因此電泳后條帶亮度會(huì )發(fā)生變化。因此建議使用EB染膠實(shí)現精準定量。
Q：DNA Marker電泳條帶分離效果不好?
A：瓊脂糖制膠濃度不合適，導致分辨率降低。制膠不均勻有時(shí)也會(huì )導致電泳異常。建議使用新制備的凝膠，制膠時(shí)注意操作中帶來(lái)的濃度誤差。一般對于大分子量片段，低濃度膠分離效果好；對于小分子量片段，高濃度膠分離效果好。
Q：不同核酸染料對DNA Marker 遷移率的影響?
A：預加GeneFinder、GelStain、GoldView到DNA Marker中，對Marker的遷移率都有一定的影響。
