mRNA Capping Kit
mRNA加帽酶試劑盒
目錄號: LC101-01
單 價(jià):¥3300
產(chǎn)品詳情介紹
本產(chǎn)品包含牛痘病毒加帽酶、mRNA帽結構2’-O-甲基轉移酶和其他加帽反應組分,可用于對T7體外轉錄(JT101)產(chǎn)生的RNA進(jìn)行5’加帽修飾。
真核生物中,轉錄形成原始mRNA后需要在5'端形成一個(gè)特殊的帽子結構,此結構對于mRNA的穩定、轉運(出核)、翻譯過(guò)程均有重要作用。通過(guò)加帽酶的酶促反應對RNA的5’端進(jìn)行加帽修飾是一種簡(jiǎn)單有效的方法:牛痘病毒加帽酶 (Vaccinia Capping Enzyme)能夠將7-甲基鳥(niǎo)苷酸帽子 (m7Gppp,Cap0)連接至RNA 5’端,形成m7Gppp5’N-mRNA(Cap0-mRNA);mRNA帽結構2’-O-甲基轉移酶 (mRNA Cap 2′-O-Methyltransferase)以Cap0-mRNA為底物,以SAM (S-腺苷甲硫氨酸)作為甲基供體將Cap0-mRNA 5’端緊鄰帽結構的第一個(gè)核苷酸的2'-OH甲基化,形成Cap1-mRNA。
Cap1結構能夠提高mRNA穩定性,有助于增強其細胞轉染和顯微注射實(shí)驗中的表達能力。
本產(chǎn)品通過(guò)在加帽反應中同時(shí)使用牛痘病毒加帽酶和mRNA Cap-2'-O-甲基轉移酶,使得加帽反應可以在同一體系中完成,反應產(chǎn)物為Cap1-mRNA,加帽效率可接近100%,并且帽子結構方向正確。
熒光鏡檢和流式細胞分選結果表明,TransGen產(chǎn)品加帽修飾的mRNA轉染CHO細胞后的表達效率顯著(zhù)高于Company N產(chǎn)品。
熒光鏡檢和流式細胞分選結果表明,利用TransGen mRNA體外合成系列產(chǎn)品(LC101)合成的mRNA毒性低、穩定性好、翻譯效率高,在不同類(lèi)型的哺乳動(dòng)物細胞中成功且穩定表達。