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    助力科研,全式金反轉錄產(chǎn)品榮登Science

    文章題目:A population of stem cells with strong regenerative potential discovered in deer antlers

    期刊:Science

    發(fā)表時(shí)間:2023年2月23日

    主要內容:西北工業(yè)大學(xué)生態(tài)環(huán)境學(xué)院邱強教授和王文教授團隊、空軍軍醫大學(xué)西京醫院黃景輝教授團隊、長(cháng)春科技學(xué)院李春義教授團隊與吉林農業(yè)大學(xué)李志鵬教授團隊等合作,在Science雜志上發(fā)表了文章 A population of stem cells with strong regenerative potential discovered in deer antlers,該研究首次在鹿角中發(fā)現、鑒定并分離了一群具有強大骨再生潛能的干細胞群,為哺乳動(dòng)物器官再生、器官損傷修復帶來(lái)新的研究方向。

    原文鏈接:https://www.science.org/doi/10.1126/science.add0488

    使用TransGen產(chǎn)品:TransScript? Uni All-in-One First-Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (One-Step gDNA Removal) (AU341)


    助力科研,全式金反轉錄產(chǎn)品榮登Science


    研究背景

    鹿角作為一個(gè)實(shí)質(zhì)的完整器官,與其他哺乳動(dòng)物不同,它每年都會(huì )再生,而且長(cháng)的比前一年還要大,造型也更加復雜。新生的鹿角,里面是軟骨,表面有一層帶絨毛的皮膚,分布著(zhù)大量血管和神經(jīng),也就是人們常說(shuō)的鹿茸。在快速生長(cháng)的季節,每天可長(cháng)2~3厘米,3個(gè)月內達到1.2米。鹿茸如此快速、完整的再生機理,此前一直不十分清楚,中國科學(xué)家在該項研究中揭示了鹿茸再生背后的奧秘。


    文章概述

    為了理解鹿角再生的細胞和分子機制,研究人員收集鹿角再生連續8個(gè)階段的樣本,建立單細胞分辨率的鹿角再生發(fā)育細胞圖譜,發(fā)現除了間質(zhì)細胞(PMCs),成纖維細胞,軟骨細胞,成骨細胞,免疫細胞,內皮細胞和血管周細胞等細胞外,還存在一種特殊的間質(zhì)細胞類(lèi)群。通過(guò)分析鹿角再生過(guò)程中細胞圖譜的動(dòng)態(tài)變化,發(fā)現在鹿角脫落前和再生0天時(shí),再生組織主要由3類(lèi)間質(zhì)細胞組成(PMC1,PMC2,PMC3),而到再生5天時(shí),細胞異質(zhì)性明顯增加,出現了第四個(gè)間質(zhì)細胞類(lèi)群,即PMC4細胞群。接著(zhù),研究人員將不同階段的鹿茸組織移植到裸鼠(不會(huì )產(chǎn)生免疫排異)模型中,發(fā)現移植再生0天鹿茸組織最終形成的組織以成纖維細胞為主,而移植再生5天鹿茸組織后,裸鼠在45天后形成了類(lèi)似鹿角的組織(骨和軟骨組織)。此外,這些PMC4細胞特異性高表達TNN、TNC、PTN、DLX5等再生相關(guān)基因,PMC4可以向下分化為成軟骨細胞和軟骨細胞,這些都表明PMC4是鹿角骨再生的關(guān)鍵細胞群,研究人員將再生5天組織定義為“鹿角再生芽基”,將PMC4細胞群定義為“鹿角芽基祖細胞”(antler blastema progenitor cells, ABPCs)。

    接著(zhù),研究人員將鹿角再生芽基的單細胞轉錄組數據與可再生的小鼠指尖、不可再生的小鼠指尖、蠑螈四肢和斑馬魚(yú)尾鰭的再生芽基單細胞轉錄組數據進(jìn)行了分析比較,發(fā)現可再生的小鼠指尖芽基中存在類(lèi)似于A(yíng)BPCs的細胞群,而其它芽基中不存在這群細胞,這一差異提示,哺乳動(dòng)物與其它非哺乳動(dòng)物有著(zhù)不同的再生機制。為了研究ABPCs在哺乳動(dòng)物的附肢再生中發(fā)揮的作用,研究人員利用表面特征標志物(FGFR2和CX43)將ABPCs從鹿角再生5天組織中分離出來(lái),發(fā)現與人類(lèi)骨髓干細胞相比,ABPCs有更強的自我更新能力,以及更顯著(zhù)的成軟骨和成骨的能力。通過(guò)裸鼠腎囊膜下異位成骨模型以及兔子骨缺損修復模型實(shí)驗,進(jìn)一步證實(shí)ABPCs的骨骼修復能力顯著(zhù)優(yōu)于大鼠BMSCs,此項發(fā)現為骨骼再生醫學(xué)研究提供了一類(lèi)新的干細胞類(lèi)群。

    為了進(jìn)一步研究鹿角快速生長(cháng)的細胞和分子機制,研究人員對鹿角快速生長(cháng)階段生長(cháng)中心的5個(gè)組織層進(jìn)行了單細胞轉錄組測序以及Bulk轉錄組測序,發(fā)現ABPCs位于鹿角的尖部,提供了鹿角持續生長(cháng)的干細胞池。通過(guò)與小鼠胚胎骨骼發(fā)育單細胞數據的比較,鑒定出了151個(gè)與骨骼發(fā)育相關(guān)的保守基因,涉及MAPK、BMP和TGFβ等信號通路。

    該研究建立了鹿角再生全周期的時(shí)間-空間細胞圖譜,系統描述了鹿角再生和快速生長(cháng)的細胞分子機制,鑒定出一類(lèi)哺乳動(dòng)物特有的干細胞群,發(fā)現該細胞群展現出了極強的自我更新及骨骼修復的能力。該研究為理解哺乳動(dòng)物再生提供了全新的認知,同時(shí)為再生醫學(xué)提供了新的研究方向。


    全式金產(chǎn)品支撐

    優(yōu)質(zhì)的試劑是科學(xué)研究的利器。全式金反轉錄產(chǎn)品TransScript? Uni All-in-One First-Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (One-Step gDNA Removal) (AU341)助力本研究。

    TransScript? Uni All-in-One First-Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (One-Step gDNA Removal) (AU341)

    該產(chǎn)品為全預混第一鏈cDNA合成試劑盒,反應時(shí)只需加入gDNA Remover、模板RNA和水,在高效合成第一鏈cDNA的同時(shí)去除RNA模板中殘留的基因組DNA,操作簡(jiǎn)單,降低污染機率。

    ●  高熱穩定性:反應溫度42℃-65℃。

    ●  高效:5分鐘完成反轉錄。

    ●  簡(jiǎn)單:一次加樣,同時(shí)完成cDNA合成和基因組DNA去除 。

    ●  精準:線(xiàn)性范圍廣,模板量低至pg級。

    ●  高兼容性:與qPCR試劑高度兼容。

    數據展示

    擴增效率高


    使用TransGen產(chǎn)品以不同起始量RNA(500 ng-50 pg,10倍梯度稀釋?zhuān)槟0暹M(jìn)行  反轉錄后定量擴增GAPDH基因。結果表明,TransGen產(chǎn)品反轉錄效率高,線(xiàn)性范圍廣。


    使用TransGen產(chǎn)品以不同起始量RNA(500 ng-50 pg,10倍梯度稀釋?zhuān)槟0暹M(jìn)行

    反轉錄后定量擴增GAPDH基因。結果表明,TransGen產(chǎn)品反轉錄效率高,線(xiàn)性范圍廣。


    適用物種范圍廣


    使用Company V1、Company V2、TransGen產(chǎn)品,以不同物種RNA為模板  進(jìn)行反轉錄后定量擴增不同基因。 結果表明,TransGen產(chǎn)品可適用于多種物種。


    使用Company V1、Company V2、TransGen產(chǎn)品,以不同物種RNA為模板

    進(jìn)行反轉錄后定量擴增不同基因。 結果表明,TransGen產(chǎn)品可適用于多種物種。


    基因組DNA去除能力強


    使用TransGen產(chǎn)品,以200 ng RNA、200 ng RNA+200 ng gDNA、200 ng gDNA為  模板進(jìn)行反轉錄后定量擴增不同基因。結果表明,TransGen產(chǎn)品具有強的gDNA去除能力。


    使用TransGen產(chǎn)品,以200 ng RNA、200 ng RNA+200 ng gDNA、200 ng gDNA為

    模板進(jìn)行反轉錄后定量擴增不同基因。結果表明,TransGen產(chǎn)品具有強的gDNA去除能力。


    使用TransScript? Uni All-in-One First-Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (One-Step gDNA Removal) (AU341)產(chǎn)品發(fā)表的部分文章:

    ●   Qin T, Zhang G K, Zheng Y, et al. A population of stem cells with strong regenerative potential discovered in deer antlers[J].Science,2023.

    ●   Wang J, Liu Z L, Zhang X, et al. krn1, a major quantitative trait locus for kernel row number in maize[J].New Phytologist,2019.

    ●   He G X, Peng Y L, Liu X L, et al. Post-responses of intertidal bivalves to recurrent heatwaves[J].Marine Pollution Bulletin,2022.

    ●   Yu Wen, Wang Y N, Jiang D, et al. A saponin from astragalus promotes pancreatic ductal organoids differentiation into insulin-producing cells[J].Phytomedicine,2022.

    ●  Yang X F, Liu S K, Lu W H, et al. Delta and jagged are candidate target genes of RNAi biopesticides for the control of Nilaparvata lugens[J].Frontiers in Bioengineering and Biotechnology,2022.



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