HIV-p24 ELISA Kit
HIV-p24 ELISA試劑盒
目錄號： NE107-01
單 價(jià)：￥5630
產(chǎn)品詳情介紹
p24是HIV病毒顆粒中高度保守的、含量最多的主要結構蛋白，是結構基因gag編碼的產(chǎn)物，在病毒的包裝和成熟過(guò)程中起到關(guān)鍵作用。慢病毒載體則是在HIV-1病毒基礎上改造而生成的病毒載體系統，可以高效地將目的基因轉入到細胞中。p24 蛋白的含量代表著(zhù)慢病毒的顆粒數，因此，可通過(guò)ELISA方法檢測p24含量來(lái)測定慢病毒的物理滴度。
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法定量測定慢病毒上清中HIV-p24含量。本試劑盒采用高親和力的HIV-p24抗體預包被酶標板，將病毒裂解液和標準品/待測樣本加入微板孔中，經(jīng)過(guò)孵育后樣本中存在的HIV-p24會(huì )與酶標板上的預包被抗體特異性結合。洗滌去除未結合物后，將生物素標記的HIV-p24檢測抗體加入微板孔中，再次孵育后檢測抗體會(huì )與錨定在酶標板上的HIV-p24特異性結合。隨后，將辣根過(guò)氧化物酶標記的鏈霉親和素(Streptavidin-HRP)加至微孔板中并孵育，通過(guò)檢測抗體上的生物素和鏈霉親和素發(fā)生的高強度非共價(jià)結合，形成“包被抗體- HIV-p24蛋白-檢測抗體-Streptavidin-HRP”免疫復合物。再次洗滌后，將顯色底物TMB加至微板孔中，HRP會(huì )催化TMB底物生成藍色產(chǎn)物，顏色反應的深淺將與樣本中HIV-p24的濃度成正相關(guān)。而后加入終止液終止反應，在450 nm波長(cháng)(參考波長(cháng)570-630 nm)處測定吸光度值。通過(guò)繪制標準曲線(xiàn)，由樣本吸光度值可計算出樣本中所含HIV-p24濃度。本試劑盒特異性強、檢測靈敏度高，同時(shí)操作更加便捷。
檢測步驟
HIV-p24 ELISA Kit 通過(guò)裂解液將慢病毒顆粒中的p24蛋白釋放出來(lái)，然后與酶標板上的預包被p24抗體結合，洗滌去除未結合物，加入生物素標記的p24檢測抗體，再加入辣根過(guò)氧化物酶標記的鏈霉親和素(Streptavidin-HRP)，形成“包被抗體- HIV-p24蛋白-檢測抗體-Streptavidin-HRP”免疫復合物，通過(guò)顯色底物TMB顏色反應的深淺指示樣本中HIV-p24的濃度。
標準曲線(xiàn)OD值示例
標準曲線(xiàn)
以標準品理論濃度與對應OD值進(jìn)行四參數擬合，得到標準曲線(xiàn)，由標準曲線(xiàn)可知，TransGen 產(chǎn)品指標良好。
